大鼠子宫内膜异位症模型的磁共振表现(1)
[摘要]目的：在SD大鼠子宫内膜异位症模型上采用磁共振扫描异位病灶，探讨大鼠子宫内膜异位症模型的磁共振表现特点，建立一个观察子宫内膜异位症的无创、可重复、动态连续的研究方法。方法：取雌性未交配性成熟大鼠，将自体子宫内膜组织种植于左侧腹壁，术后进行组织形态学观察，并对异位病灶进行MRI扫描。结果：模型成功，异位病灶在DWI图像上呈明显的亮高信号，T1WI图像上呈低信号，T2WI图像上呈高信号，边界清楚，CE-T1WI图像上内部无增强。结论：此方法建立的大鼠子宫内膜异位症模型在MRI图像上可以清晰地观察到病灶部位，便于反复实验及连续性观察研究。
[关键词]子宫内膜异位症模型；MRI
子宫内膜异位症(EMs)是一种激素依赖性的良性病变，是妇女常见病、多发病[1]。磁共振成像(MRI)作为一种无创伤的影像检查手段，临床诊断子宫内膜异位症的敏感性和准确性都很高[2]。动物核磁共振技术，是目前新兴的药理研究方法[3]。它利用MRI技术在药理模型动物上进行非致死性连续观察，具有活体、无创伤等优点，较传统的药理实验方法有独特的优势，可以动态地监测动物模型的发展及药物持续疗效。国内尚无采用磁共振观察大鼠EMs模型的报道，本研究采用自体子宫内膜移植法制作大鼠EMs模型并使用1.5T MRI对异位病灶进行观察，分析异位病灶的磁共振表现特点，建立大鼠子宫内膜异位症模型的影像学研究方法。
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1材料
1.1试剂与仪器戊巴比妥钠(美国Sigma公司，批号018k0754)；马根维显(广州先灵药业有限公司，批号052A11)；雌二醇(天津金耀氨基酸有限公司，批号1005051)。磁共振仪(美国GE Echospeed 1.5T)，GE AW 4.3工作站。
1.2动物健康雌性SD大鼠10只，清洁级，体重250～300 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物质量合格证号SCXK(沪)2007-0005，大鼠合格证号2007000515645。
2方法
2.1动物模型制作[4]10只SD大鼠用3%戊巴比妥钠行腹腔注射麻醉，备皮、消毒，下腹部正中切口，逐层打开腹壁。找到左侧子宫，切取子宫组织。将切下的子宫组织放在盛有生理盐水的培养皿中，纵行解剖开子宫段，剪取5 mm×5 mm的子宫内膜组织。令其内膜面贴于左侧腹壁，用缝合线将四角与左侧腹壁肌肉缝合，逐层缝合切口。术后连续3 d注射青霉素16万U，正常喂养。术后第2天开始肌注雌二醇0.1 mg·kg-1·d-1，每隔4 d 1次，共3次。
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2.2整体观察造模大鼠种植后第21，28天分别用3%的戊巴比妥麻醉，麻醉后固定大鼠于超净工作台上，腹部剃毛，皮肤常规消毒，下腹部正中切口，逐层打开腹腔，观察模型大鼠的异位病灶形态学变化。
2.3磁共振检查方法[5] 使用GE Excite Echospeed HD 1.5T 超导磁共振成像设备，3英寸表面线圈检查。冠状面定位，常规行横断面T1WI，T2WI和弥散成像(DWI)扫描，层厚3 mm，间隔0.2 mm，FOV 10 cm×10 cm，矩阵224×192，2NEX。T1WI：SE序列，TR/TE=550 ms/24 ms。T2WI：FSE序列，TR/TE=2 920 ms/88 ms。DWI：SE/EPI，TR/TE：4 000/71.6，矩阵64×96，8NEX，梯度因子(b)为500。增强扫描采用：SE序列，TR/TE=600 ms/27 ms。横断面T2×PWI检查：单次激发GRE-EPI序列，TR/TE=1 500 ms/35 ms， FA=90°，层厚3 mm，间隔0.2 mm， FOV 10 cm×10 cm，矩阵64×64，1NEX。每选定层面获取30幅基本图像后注入0.3 mmol·kg-1马根维显，共获取100幅图像，成像时间150 s。T1增强：横断面T2×PWI检查后立即磁共振T1成像。
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2.4磁共振影像分析[5-6]异位病灶信号强度计算：在大鼠的T1WI，T2WI，DWI，CE-T1WI图上，选取含异位病灶最明显、连续的2～3个层面。在GE后处理工作站AW 4.3上，手动画出异位病灶与周围正常肌肉，自动获得信号强度(signal intensity，SI)，分别计算所选病灶与肌肉的信号强度平均值，代表病灶与肌肉的SI。
异位病灶体积计算：在大鼠的磁共振图像上，选取含异位病灶显示最明显、连续的2～3个层面。在GE后处理工作站AW 4.3上，手动画出异位病灶范围，可得病灶面积，通过公式计算为每层病灶面积×(层厚+层间隔)。
2.5病理学检查将取出的大鼠异位内膜包块和正常大鼠子宫置于10%甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋，4 μm厚度连续切片，HE染色，光学显微镜下观察异位内膜及正常子宫内膜的组织形态学特点及差异。
3结果
, 百拇医药
3.1整体观察左侧腹壁的移植物成囊状，生长良好，体积增大，呈隆起暗红色的或透亮的小囊泡，壁薄，内部充满清亮积液，囊泡高度≥2 mm，造模成功，见图1。右侧腹壁光滑，无任何移植物生长。
3.2MRI表现图2显示了种植后第16，23，30天的异位病灶MRI扫描图像(箭头处表示异位病灶)。种植后第16天异位灶在DWI图像上呈亮高信号(A)，T1WI图像上呈均匀低信号(B)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(C)。种植后第23天异位灶在DWI图像上呈亮高信号(D)，T1WI图像上呈均匀低信号(E)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(F)，在CE-T1WI图像上异位灶周围一圈轮廓增强，中心信号无增强(G)。种植后第30天的异位病灶MRI扫描图像。异位灶在DWI图像上呈亮高信号(H)，T1WI图像上呈均匀低信号(I)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(J)。具体各序列信号强度结果见表1。, 百拇医药(王佩娟,姚楠,黄德健,张健,倪以成)
[关键词]子宫内膜异位症模型；MRI
子宫内膜异位症(EMs)是一种激素依赖性的良性病变，是妇女常见病、多发病[1]。磁共振成像(MRI)作为一种无创伤的影像检查手段，临床诊断子宫内膜异位症的敏感性和准确性都很高[2]。动物核磁共振技术，是目前新兴的药理研究方法[3]。它利用MRI技术在药理模型动物上进行非致死性连续观察，具有活体、无创伤等优点，较传统的药理实验方法有独特的优势，可以动态地监测动物模型的发展及药物持续疗效。国内尚无采用磁共振观察大鼠EMs模型的报道，本研究采用自体子宫内膜移植法制作大鼠EMs模型并使用1.5T MRI对异位病灶进行观察，分析异位病灶的磁共振表现特点，建立大鼠子宫内膜异位症模型的影像学研究方法。
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1.1试剂与仪器戊巴比妥钠(美国Sigma公司，批号018k0754)；马根维显(广州先灵药业有限公司，批号052A11)；雌二醇(天津金耀氨基酸有限公司，批号1005051)。磁共振仪(美国GE Echospeed 1.5T)，GE AW 4.3工作站。
1.2动物健康雌性SD大鼠10只，清洁级，体重250～300 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物质量合格证号SCXK(沪)2007-0005，大鼠合格证号2007000515645。
2方法
2.1动物模型制作[4]10只SD大鼠用3%戊巴比妥钠行腹腔注射麻醉，备皮、消毒，下腹部正中切口，逐层打开腹壁。找到左侧子宫，切取子宫组织。将切下的子宫组织放在盛有生理盐水的培养皿中，纵行解剖开子宫段，剪取5 mm×5 mm的子宫内膜组织。令其内膜面贴于左侧腹壁，用缝合线将四角与左侧腹壁肌肉缝合，逐层缝合切口。术后连续3 d注射青霉素16万U，正常喂养。术后第2天开始肌注雌二醇0.1 mg·kg-1·d-1，每隔4 d 1次，共3次。
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2.2整体观察造模大鼠种植后第21，28天分别用3%的戊巴比妥麻醉，麻醉后固定大鼠于超净工作台上，腹部剃毛，皮肤常规消毒，下腹部正中切口，逐层打开腹腔，观察模型大鼠的异位病灶形态学变化。
2.3磁共振检查方法[5] 使用GE Excite Echospeed HD 1.5T 超导磁共振成像设备，3英寸表面线圈检查。冠状面定位，常规行横断面T1WI，T2WI和弥散成像(DWI)扫描，层厚3 mm，间隔0.2 mm，FOV 10 cm×10 cm，矩阵224×192，2NEX。T1WI：SE序列，TR/TE=550 ms/24 ms。T2WI：FSE序列，TR/TE=2 920 ms/88 ms。DWI：SE/EPI，TR/TE：4 000/71.6，矩阵64×96，8NEX，梯度因子(b)为500。增强扫描采用：SE序列，TR/TE=600 ms/27 ms。横断面T2×PWI检查：单次激发GRE-EPI序列，TR/TE=1 500 ms/35 ms， FA=90°，层厚3 mm，间隔0.2 mm， FOV 10 cm×10 cm，矩阵64×64，1NEX。每选定层面获取30幅基本图像后注入0.3 mmol·kg-1马根维显，共获取100幅图像，成像时间150 s。T1增强：横断面T2×PWI检查后立即磁共振T1成像。
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2.4磁共振影像分析[5-6]异位病灶信号强度计算：在大鼠的T1WI，T2WI，DWI，CE-T1WI图上，选取含异位病灶最明显、连续的2～3个层面。在GE后处理工作站AW 4.3上，手动画出异位病灶与周围正常肌肉，自动获得信号强度(signal intensity，SI)，分别计算所选病灶与肌肉的信号强度平均值，代表病灶与肌肉的SI。
异位病灶体积计算：在大鼠的磁共振图像上，选取含异位病灶显示最明显、连续的2～3个层面。在GE后处理工作站AW 4.3上，手动画出异位病灶范围，可得病灶面积，通过公式计算为每层病灶面积×(层厚+层间隔)。
2.5病理学检查将取出的大鼠异位内膜包块和正常大鼠子宫置于10%甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋，4 μm厚度连续切片，HE染色，光学显微镜下观察异位内膜及正常子宫内膜的组织形态学特点及差异。
3结果
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3.1整体观察左侧腹壁的移植物成囊状，生长良好，体积增大，呈隆起暗红色的或透亮的小囊泡，壁薄，内部充满清亮积液，囊泡高度≥2 mm，造模成功，见图1。右侧腹壁光滑，无任何移植物生长。
3.2MRI表现图2显示了种植后第16，23，30天的异位病灶MRI扫描图像(箭头处表示异位病灶)。种植后第16天异位灶在DWI图像上呈亮高信号(A)，T1WI图像上呈均匀低信号(B)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(C)。种植后第23天异位灶在DWI图像上呈亮高信号(D)，T1WI图像上呈均匀低信号(E)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(F)，在CE-T1WI图像上异位灶周围一圈轮廓增强，中心信号无增强(G)。种植后第30天的异位病灶MRI扫描图像。异位灶在DWI图像上呈亮高信号(H)，T1WI图像上呈均匀低信号(I)，T2WI图像上呈高信号，信号均匀，边界清楚(J)。具体各序列信号强度结果见表1。, 百拇医药(王佩娟,姚楠,黄德健,张健,倪以成)