积雪草苷对兔耳增生性瘢痕组织中胶原纤维及TGF—β1表达的影响(2)
1 材料和方法
1.1 实验器材
清洁级日本大耳白兔20只，雄性，体重2.5～3.0kg(湖南中医药大学动物室)。积雪草苷干粉(上海医药工业研究所)；苏木精、伊红，Masson染色试剂盒(南京森贝伽生物科技有限公司)；TGF-β1单克隆抗体试剂盒(上海恒远生物科技有限公司)；生物光学显微镜(宁波北仑方远光电仪器有限公司)；测微尺(上海光学仪器厂)；瘢痕硬度精密测定仪(重庆里博仪器有限公司)；常规组织切片制作及病理染色全套等设备。
1.2 方法
1.2.1 兔耳瘢痕模型的建立与给药
日本大耳白兔20只，分为实验组和对照组。实验组再细分为高中低三种积雪草苷不同浓度梯度组；对照组则细分为模型组和空白对照组。实验组和对照组兔耳腹面剃毛，硫化钠脱毛，戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉。兔耳区备皮后，常规络合碘消毒，铺无菌巾单。麻醉满意后，在严格无菌操作下，避开大血管，沿兔耳腹侧中段长轴，去除全层皮肤及软骨膜，保留软骨，制成直径为1cm大小的圆形创面。每侧兔耳分别制得4个创面，相连创面间隔在1cm以上。创面成功制成后用无菌生物通透性薄膜覆盖以预防感染。术后21d左右创面完全愈合，均去上皮化，此时形成成熟兔耳瘢痕模型[3]。实验组和模型组早晚皮下注射药物，空白对照组不做任何处理 ......
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1.1 实验器材
清洁级日本大耳白兔20只，雄性，体重2.5～3.0kg(湖南中医药大学动物室)。积雪草苷干粉(上海医药工业研究所)；苏木精、伊红，Masson染色试剂盒(南京森贝伽生物科技有限公司)；TGF-β1单克隆抗体试剂盒(上海恒远生物科技有限公司)；生物光学显微镜(宁波北仑方远光电仪器有限公司)；测微尺(上海光学仪器厂)；瘢痕硬度精密测定仪(重庆里博仪器有限公司)；常规组织切片制作及病理染色全套等设备。
1.2 方法
1.2.1 兔耳瘢痕模型的建立与给药
日本大耳白兔20只，分为实验组和对照组。实验组再细分为高中低三种积雪草苷不同浓度梯度组；对照组则细分为模型组和空白对照组。实验组和对照组兔耳腹面剃毛，硫化钠脱毛，戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉。兔耳区备皮后，常规络合碘消毒，铺无菌巾单。麻醉满意后，在严格无菌操作下，避开大血管，沿兔耳腹侧中段长轴，去除全层皮肤及软骨膜，保留软骨，制成直径为1cm大小的圆形创面。每侧兔耳分别制得4个创面，相连创面间隔在1cm以上。创面成功制成后用无菌生物通透性薄膜覆盖以预防感染。术后21d左右创面完全愈合，均去上皮化，此时形成成熟兔耳瘢痕模型[3]。实验组和模型组早晚皮下注射药物，空白对照组不做任何处理 ......
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