1.4 荧光实时定量PCR法检测MMP-1和MMP-3 mRNA表达：细胞接受紫外线照射后24h，吸弃培养液，加入Trizol提取总RNA，参照说明书逆转录cDNA。应用Primer Premier设计引物，由上海生工生物技术公司合成，MMP-1正向引物5’-GGCTGTTCAGGGACAGAATGTG-3’，反向引物5’-GGCCAATTCCAGGAAAGTCAT-3’;MMP-3正向引物5’-AAGGAAATCAATTCTGGGCTATC-3’，反向引物5’-TTTGAGTCAATCCCTGGAAAGTC-3’;内参β-actin正向引物5’-ACCAACTGGGACGACATGGA-3’，反向引物5’-CCCTCGTAGATGGGCACAGT-3’。反应条件：95℃ 3min;95℃ 20s，60℃ 20s，72℃ 30s，40个循环。采用2-△△Ct表示目标基因的相对表达量。

    1.5 ELISA法检测Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白表达：紫外线照射后24h，收集细胞培养上清液，采用双抗体夹心ABC-ELISA法，参照试剂盒(Southernbiotech ......