RP-HPLC法同时测定加味黄龙颗粒中大黄酸\大黄素和大黄酚含量(2)
http://www.100md.com
2011年2月15日
 |
| 第1页 |
参见附件(3641KB，3页)。
2.7 精密度试验 取对照品溶液，精密吸取10 μl注入液相色谱仪，连续进样5次，测得大黄酸、大黄素和大黄酚峰面积的相对标准差(RSD)均<3%。结果表明：精密度良好，该测定方法可行。
2.8 稳定性试验 取精密度实验的样品分别在0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h按 “2.1”项色谱条件测定其含量，测得样品中大黄酸、大黄素和大黄酚峰面积的相对标准差(RSD)均<3%，结果表明：供试品溶液在24 h内稳定。
2.9 重复性试验 按照正文拟定的含量测定方法，对同一批研究用样品，同时制备5份样品供试品溶液，按照上述“2.1”项色谱条件测定峰面积并计算大黄酸、大黄素和大黄酚的含量，其相对标准偏差<3%，结果表明：提取和检测方法重复性好，该方法可行。
2.10 回收率试验 精密称取已知含量的样品(大黄酸2.5588 mg/g、大黄素2.0246 mg/g和大黄酚2.1159 mg/g)6份,约0.25 g,分别精密加入一定量的大黄酸、大黄素及大黄酚对照品，按照正文拟定的供试品制备方法制备加样回收供试品溶液，平行操作6份，按照上述“2.1”项色谱条件测定峰面积并计算其回收率，结果见表1。表1
加样回收率试验结果(n=6)
成分序号样品量(μg)加入量(μg)测得值(μg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)
大黄酸10.128240.102660.23224101.31 98.17±1.941.98
20.128660.102560.2270895.96
30.128540.128120.2526896.89
40.128180.128320.2535497.69
50.127780.153160.2772897.61
60.127560.153760.2806899.58
大黄素10.100220.080300.1795298.75 98.83±2.022.05
20.100360.081760.18316101.27
30.102520.102980.2022896.87
40.102980.102060.2028897.88
50.101160.121980.22470101.28
60.104780.122360.2233496.89
大黄酚10.106420.085760.1892496.57 96.81±0.710.73
20.106380.083900.1871096.21
30.106940.106440.2112097.95
40.106020.106220.2095097.42
50.105960.127820.2291296.35
60.106160.125720.2273096.362.11 样品的测定 取3批颗粒按上述方法进行分析测定计算，3批次样品大黄酸、大黄素及大黄酚平均含量分别为2.5622 mg/g、2.0209 mg/g、2.1238 mg/g,RSD分别为为0.12%、0.06%、0.20%。结果见表2。
表2
样品测定结果(mg/g,n＝3)
批号大黄酸大黄素大黄酚
0811192.56552.02122.1233
0811272.55982.02182.1284
0812112.56122.01962.1198
平均值2.56222.02092.1238
RSD(%)0.120.060.20
3 讨论
3.1 流动相及指标成分的选择 在本实验条件下，大黄酸的保留时间为6.5 min左右，大黄素的保留时间为8.5 min左右，大黄酚的保留时间为12 min左右分离效果好，达到基线分离，且在20 min内即可分离完毕。黄龙颗粒由大黄、芒硝、甘草、当归等中药组成，大黄为君药，故选择其中的3种蒽醌类成分作为含量测定的指标成分。甲醇0.1%磷酸溶液，甲醇0.05%磷酸溶液，甲醇水的洗脱系统进行考察。以甲醇水为流动相基础系统，进行了pH及极性调整 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3641KB，3页)。