MicroRNA-21在卵巢癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系(2)
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参见附件。
1.3 引物设计
microRNA-21引物序列，上游：5′-GCCCGCTAGCTTATCAGACTGATG-3′；下游，5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′。内参为U6引物序列，上游： 5′-GCTTCGGCAGCACATATACT-AAAAT-3′；下游：5′-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3′。以上引物均由上海生工公司合成。
1.4 卵巢组织microRNA-21的提取及qRT-PCR
严格按照RNA提取试剂盒的操作说明提取总RNA，用紫外分光光度计测量RNA A值，选取A 260 nm/280 nm比值在1.8~2.0的样本进行进行逆转录反应，合成cDNA。以cDNA为模板，严格按照qRT-PCR试剂盒说明书进行操作，反应参数为94℃ 4 min；94℃ 30 s，62℃ 30 s，40个循环。
1.5 统计学处理
数据采用SPSS 18.0进行统计分析，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 microRNA-21在正常卵巢组织及卵巢癌中相对表达量的比较
正常卵巢组织中microRNA-21的相对表达量为4.23±1.02，明显低于卵巢癌组织的7.64±0.87(t=2.306，P<0.05)。
2.2 microRNA-21的表达与临床病理因素间的关系
临床分期0～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期的卵巢癌组织中microRNA-21的相对表达量分别为4.42±0.82、7.75±1.13，其差异有统计学意义(t=1.962，P<0.05)；无淋巴结转移组与有淋巴转移组的相对表达量分别为4.99±1.02、7.24±0.91，其差异有统计学意义(t=1.648，P<0.05)；但microRNA-21在卵巢癌组织中的表达与患者的年龄、临床病理分型无关 ......
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