Ⅳ型胶原多克隆抗体的制备及性质研究(1)
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[摘要]目的 通过免疫母鸡制备抗人Ⅳ型胶原多克隆抗体(IgY)，为检测人血清Ⅳ型胶原含量提供IgY。 方法 采用人胎盘来源的Ⅳ型胶原蛋白作为抗原，免疫Leghorn母鸡，采用PEG方法分离纯化鸡卵黄中的抗体，获得抗体粗提物。经Sephadex G100凝胶过滤制备多克隆抗体纯品。使用SDS-PAGE、免疫琼脂双向扩散等方法对提取物的含量、纯度及特异性进行鉴定。 结果 电泳结果显示，抗体粗提物纯度为81%。抗体纯品仅在70kd和25kd处各有一条带，纯度达到96%；免疫琼脂双向扩散实验结果显示，抗体纯品、粗品及免疫三周后鸡血清均与中心孔的抗原形成抗原抗体复合物的乳白色沉淀线。 结论 本研究分离纯化方法制备的抗Ⅳ型胶原IgY，具有抗体纯度高、特异性强等特点，为多克隆抗体广泛应用奠定了基础。
[关键词] IgY；Ⅳ型胶原；多克隆抗体
[中图分类号] R392 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2014)10-27-04
[Abstract] Objective To detect the content of collagen type Ⅳ in human serum， and prepare polyclonal antibody (IgY) against it by immunized hens. Methods The collagen typeⅣ from human placenta was used as antigen to immunize Leghorn hens ......
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