组织学确诊宫颈病变中的HPV流行情况
【摘 要】目的：了解本地区HPV病毒的致病性。方法：通过回顾性研究我院住院组织学确诊宫颈病变的107例患者的HPV感染情况，了解HPV病毒在不同程度宫颈病变中的感染情况及其亚型分布。结果：各组HPV阳性率分别为46.67%、85.71%、82.61%、80%。结论：宫颈高度病变中HPV感染阳性率均在80%以上，且以HPV16型最常见，其次为HPV52、58、33型。本文为制定适宜本地区的宫颈疾病防治计划提供临床数据。
【关键词】宫颈病变；人乳头瘤病毒；基因分型
本地区相对落后，近两年才开始进行宫颈HPV病毒筛查，因此有关本地区宫颈病变患者中HPV感染情况尚无报道，本文回顾性分析了本院组织学确诊宫颈病变的107例患者，了解在这些病变中HPV病毒的感染情况及亚型分布，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月至2014年10月本院组织学确诊为宫颈病变的患者107例，其中CINI 20例，CINII 35例，CINIII 31例，宫颈癌21例。年龄23～62岁，平均年龄40岁。所有患者均有性生活史，其中104例有分娩史，3例无分娩史，1例未婚。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 由专业人员用窥阴器暴露宫颈，以配套专用宫颈刷置于受检者宫颈口内，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5周以获得足够的上皮细胞样本，取出宫颈刷，将其放入标有病人编号的取样管中，沿刷柄折痕将宫颈刷柄折断，旋紧洗脱管盖，做好样品标识，24小时内送检。
1.2.2 仪器与试剂 采用德国eppendoff公司的梯度聚合酶链反应(PCR)仪、凯普生物化学有限公司的HybriMax医用核酸分子快速杂交仪、DNA提取试剂、HPV核酸扩增分型检测试剂及HPV分型基因芯片薄膜。
1.2.3 检测方法 提取HPV DNA；基因扩增；导流杂交；结果根据芯片薄膜HPV亚型分布的相应着色点进行判断。
1.3 结果判断 ①检测结果阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点。②根据膜条HPV分布图，判断阳性点为何种HPV病毒类型。③Biotin对照点，反应酶与显色液反应，在检测中应为阳性。④以上两对照点为阳性，其他点为阴性，应判定本试剂盒的HPV发型DNA检测结果为阴性。如果有一个或一个以上HPV发型点为阳性，代表该类型HPV检测阳性，结果为单一或混合HPV感染。
2 结果
2.1 不同宫颈病变患者HPV感染阳性情况比较
107例患者中，CINI 20例，其中5例未进行HPV检测，8例阴性，7例阳性，单一感染4例，重复感染3例；CINII 35例，其中7例未进行HPV检测，4例阴性，24例阳性，18例单一感染，6例重复感染；CINIII 31例，其中8例未进行HPV检测，4例阴性，19例阳性，16例单一感染，3例重复感染；宫颈癌21例，其中11例未进行HPV检测，2例阴性，8例阳性，5例单一感染，3例重复感染。各组HPV阳性率分别为46.67%、85.71%、82.61%、80%。漏检率分别为25%、20%、25.81%、52.38%。
2.2 不同病变中HPV亚型的分布情况
107例患者中有76例进行了HPV检测，31例未检测，在检测的患者中58例HPV阳性，18例阴性，CINI患者中HPV感染前三位为HPV39、53、58，CINII患者中前三位为HPV16、52、33和68，其中33和68型检出结果相同，CINIII患者中前三位为HPV16、58、33和52，其中33和52型检出例数一致，宫颈癌患者中HPV前两位为HPV16、33，在宫颈癌前病变及宫颈癌患者中HPV16感染率均在首位，均为高危型HPV感染，仅在CINII中有1例低危型HPV单一感染病例。其中HPV16在宫颈癌前病变及宫颈癌中阳性率均领先于其他型别，其可能为本地区妇女宫颈高级别病变的最主要致病HPV亚型，其次为HPV52、58、33。
3 讨论
本研究中的107例患者，76例进行了HPV病毒检测，58例阳性，18例阴性，31例未进行检测，在进行检测的患者中，HPV阳性率为76.32%，而在CINII及CINIII患者中HPV感染阳性率均在82%以上，这与国内外的报道大多一致。而在宫颈癌中的阳性率为80%，与几乎所有文献都报道的100%有所差异，这是否与检测手段或方法有一定关系尚不确定。且宫颈癌患者有一半未进行HPV检测，实际的感染阳性率应该远远高于80%。在高度上皮内病变及宫颈癌患者中，有一定比例的复合感染，但均以单一感染为主，即使是多重感染，也多以某一单一亚型感染为主，这与癌症单克隆起源的科学证据一致。且也有文章指出，宫颈癌发生的必要条件是HPV持续感染，复合感染并不等于持续感染。
本资料研究结果显示各级别病变中除低级别病变CINI外，在高级别病变及宫颈癌中HPV感染型别差异不大，CINI中依次为(递减)：HPV39、53、58，CINII为：HPV16、52、33和68，其中33和68型检出结果相同，CINIII为：HPV16、58、33和52，其中33和52型检出例数一致，宫颈癌患者中为：HPV16、33。与北京地区的HPV16、52、58、33[1]相比基本一致，而与辽宁地区的常见型别HPV16、58、18、52和33[2]相比，有相同的地方，但也有不同之处。三个不同的地区相比，HPV16感染率均位于第一位，且本研究也再一次显示，随宫颈病变程度增加HPV16感染率明显上升，在CINII、CINIII及宫颈癌中感染率依次为37.5%、47.37%和87.5%。其次是HPV58、52和33型。这种差异可能与本地区的地理环境、社会生因素或宿主的遗传免疫因素有关，有本地区的人群和地域特异性。
综上所述，贵州省黔西南布依族苗族少数民族地区妇女宫颈病变HPV基因型流行特征有一定的地域特异性，在筛查及疫苗引进方面应重点考虑HPV16、52、58、33四种基因型。也希望本地区宫颈癌筛查工作越来越规范，减少漏检率，提供更精确的流行病学资料。
参考文献
[1]刘志忠，乔超，方芳，等.北京地区宫颈病变妇女37种HPV亚型流行特征[J].中国卫生检验杂志，2014，24(14)：2057-2060.
[2]王诗卓，王宁，魏恒，等.辽宁地区人乳头瘤病毒的感染状态及其高危基因型的分布情况[J].中国医科大学学报，2012，41(2)：146-147., http://www.100md.com(姚娟 郑丽波 周婷婷)
【关键词】宫颈病变；人乳头瘤病毒；基因分型
本地区相对落后，近两年才开始进行宫颈HPV病毒筛查，因此有关本地区宫颈病变患者中HPV感染情况尚无报道，本文回顾性分析了本院组织学确诊宫颈病变的107例患者，了解在这些病变中HPV病毒的感染情况及亚型分布，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月至2014年10月本院组织学确诊为宫颈病变的患者107例，其中CINI 20例，CINII 35例，CINIII 31例，宫颈癌21例。年龄23～62岁，平均年龄40岁。所有患者均有性生活史，其中104例有分娩史，3例无分娩史，1例未婚。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 由专业人员用窥阴器暴露宫颈，以配套专用宫颈刷置于受检者宫颈口内，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5周以获得足够的上皮细胞样本，取出宫颈刷，将其放入标有病人编号的取样管中，沿刷柄折痕将宫颈刷柄折断，旋紧洗脱管盖，做好样品标识，24小时内送检。
1.2.2 仪器与试剂 采用德国eppendoff公司的梯度聚合酶链反应(PCR)仪、凯普生物化学有限公司的HybriMax医用核酸分子快速杂交仪、DNA提取试剂、HPV核酸扩增分型检测试剂及HPV分型基因芯片薄膜。
1.2.3 检测方法 提取HPV DNA；基因扩增；导流杂交；结果根据芯片薄膜HPV亚型分布的相应着色点进行判断。
1.3 结果判断 ①检测结果阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点。②根据膜条HPV分布图，判断阳性点为何种HPV病毒类型。③Biotin对照点，反应酶与显色液反应，在检测中应为阳性。④以上两对照点为阳性，其他点为阴性，应判定本试剂盒的HPV发型DNA检测结果为阴性。如果有一个或一个以上HPV发型点为阳性，代表该类型HPV检测阳性，结果为单一或混合HPV感染。
2 结果
2.1 不同宫颈病变患者HPV感染阳性情况比较
107例患者中，CINI 20例，其中5例未进行HPV检测，8例阴性，7例阳性，单一感染4例，重复感染3例；CINII 35例，其中7例未进行HPV检测，4例阴性，24例阳性，18例单一感染，6例重复感染；CINIII 31例，其中8例未进行HPV检测，4例阴性，19例阳性，16例单一感染，3例重复感染；宫颈癌21例，其中11例未进行HPV检测，2例阴性，8例阳性，5例单一感染，3例重复感染。各组HPV阳性率分别为46.67%、85.71%、82.61%、80%。漏检率分别为25%、20%、25.81%、52.38%。
2.2 不同病变中HPV亚型的分布情况
107例患者中有76例进行了HPV检测，31例未检测，在检测的患者中58例HPV阳性，18例阴性，CINI患者中HPV感染前三位为HPV39、53、58，CINII患者中前三位为HPV16、52、33和68，其中33和68型检出结果相同，CINIII患者中前三位为HPV16、58、33和52，其中33和52型检出例数一致，宫颈癌患者中HPV前两位为HPV16、33，在宫颈癌前病变及宫颈癌患者中HPV16感染率均在首位，均为高危型HPV感染，仅在CINII中有1例低危型HPV单一感染病例。其中HPV16在宫颈癌前病变及宫颈癌中阳性率均领先于其他型别，其可能为本地区妇女宫颈高级别病变的最主要致病HPV亚型，其次为HPV52、58、33。
3 讨论
本研究中的107例患者，76例进行了HPV病毒检测，58例阳性，18例阴性，31例未进行检测，在进行检测的患者中，HPV阳性率为76.32%，而在CINII及CINIII患者中HPV感染阳性率均在82%以上，这与国内外的报道大多一致。而在宫颈癌中的阳性率为80%，与几乎所有文献都报道的100%有所差异，这是否与检测手段或方法有一定关系尚不确定。且宫颈癌患者有一半未进行HPV检测，实际的感染阳性率应该远远高于80%。在高度上皮内病变及宫颈癌患者中，有一定比例的复合感染，但均以单一感染为主，即使是多重感染，也多以某一单一亚型感染为主，这与癌症单克隆起源的科学证据一致。且也有文章指出，宫颈癌发生的必要条件是HPV持续感染，复合感染并不等于持续感染。
本资料研究结果显示各级别病变中除低级别病变CINI外，在高级别病变及宫颈癌中HPV感染型别差异不大，CINI中依次为(递减)：HPV39、53、58，CINII为：HPV16、52、33和68，其中33和68型检出结果相同，CINIII为：HPV16、58、33和52，其中33和52型检出例数一致，宫颈癌患者中为：HPV16、33。与北京地区的HPV16、52、58、33[1]相比基本一致，而与辽宁地区的常见型别HPV16、58、18、52和33[2]相比，有相同的地方，但也有不同之处。三个不同的地区相比，HPV16感染率均位于第一位，且本研究也再一次显示，随宫颈病变程度增加HPV16感染率明显上升，在CINII、CINIII及宫颈癌中感染率依次为37.5%、47.37%和87.5%。其次是HPV58、52和33型。这种差异可能与本地区的地理环境、社会生因素或宿主的遗传免疫因素有关，有本地区的人群和地域特异性。
综上所述，贵州省黔西南布依族苗族少数民族地区妇女宫颈病变HPV基因型流行特征有一定的地域特异性，在筛查及疫苗引进方面应重点考虑HPV16、52、58、33四种基因型。也希望本地区宫颈癌筛查工作越来越规范，减少漏检率，提供更精确的流行病学资料。
参考文献
[1]刘志忠，乔超，方芳，等.北京地区宫颈病变妇女37种HPV亚型流行特征[J].中国卫生检验杂志，2014，24(14)：2057-2060.
[2]王诗卓，王宁，魏恒，等.辽宁地区人乳头瘤病毒的感染状态及其高危基因型的分布情况[J].中国医科大学学报，2012，41(2)：146-147., http://www.100md.com(姚娟 郑丽波 周婷婷)